Prueba de movilidad a 25°C para Listeria monocytogenes. Fuente: Benadof, Dona. (2008). Listeria monocytogenes. Revista chilena de infectología, 25(5), 350. https://dx.doi.org/10.4067/S0716-10182008000500005
FUNDAMENTOS DE LA PRUEBA
Existen diferentes técnicas que permiten demostrar la movilidad bacteriana. Listeria se observa en forma de bacilos delgados, cortos, con un movimiento de rotación débil o por tumbos. Cocobacilos o bacilos largos que presenten movimiento rápido de translación, no son Listeria spp..
En medios líquidos
Realización de la prueba: A partir de colonias típicas subcultivar en TSB (Caldo Tripticasa Soya). Incubar a 20 – 25ºC hasta obtener turbidez (8 a 24 horas). Preparar montaje en fresco entre porta y cubreobjeto, con una ansada del cultivo líquido y observar con inmersión en contraste de fases
En medios sólidos
Ingredientes: Peptona de caseína..................... 20 g
Peptona de carne ................................................ 6.1 g
Agar ........................................................................ 3.5 g
Agua destilada......................................................1000 ml
PREPARACIÓN DEL MEDIO
Disolver ingredientes en agua, calentar suavemente. Ajustar pH 7.3. Fraccionar 5 ml por tubo. Esterilizar durante 15 minutos a 121 ºC. Dejar solidificar en forma de columna.
REALIZACIÓN DE LA PRUEBA
Sembrar con ansa aguja en el centro del medio, introduciendo la aguja hacia el fondo y extraer siguiendo el mismo recorrido de entrada. Incubar a 25 ºC durante 48 horas.
LECTURA E INTERPRETACIÓN
Observar desarrollo alrededor de la línea de punción. En cultivos positivos se produce zona de difusión del desarrollo a los lados de la línea de inoculación. Los cultivos de Listeria spp. son móviles y producen un desarrollo típico en forma de sombrilla. Si fuera negativo, proseguir incubando otros 5 días y observar nuevamente.
CONTROL DE CALIDAD
Control positivo: Listeria monocytogenes ATCC 19111; ATCC 13932
Control negativo: Enterococcus faecalis ATCC 29212
Fuente: Servicio Bacteriología Especial Departamento de Bacteriología Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas A.N.L.I.S. “Dr. Carlos G. Malbrán” (2008). Manual de Procedimientos Aislamiento, identificación y caracterización de Listeria monocytogenes. Buenos Aires: Callejo, R. , Prieto, M. , Martínez, C. , Aguerre, L. , Rocca, F. y Martínez G.
