S. pneumoniae prueba solubilidad en bilis positiva se observa transparencia indica que las células han desaparecido.

Prueba solubilidad en bilis negativa se observa turbidez.

Fuente: OMS. (2004).Manual de Laboratorio para la Identificación y Prueba de Susceptibilidad a los Antimicrobianos de Patógenos Bacterianos de Importancia para la Salud Pública en el Mundo en Desarrollo. Atlanta: Perilla M., Ajello G., Bopp Ch. y Elliott J.

 

FUNDAMENTO
Las sales de bilis, específicamente el desoxicolato y el taurocolato de sodio tienen la capacidad de lisar selectivamente a Streptococcus pneumoniae, cuando una suspensión del microorganismo se agrega a una solución de las sales (suspensión realizada a partir de un cultivo fresco de 18-24 horas en agar sangre de carnero al 5%).
S. pneumoniae produce enzimas autolíticas que son las responsables de la característica umbilicada de la colonia en cultivos viejos. La adición de sales de biliares a la suspensión de la bacteria activa las autolisinas y acelera el proceso de lisis, lo cual está asociado a la disminución de la tensión superficial entre el medio y la membrana celular bacteriana.

PROCEDIMIENTO
A partir de un subcultivo puro, prepare una suspensión densa del microorganismo en solución salina estéril, con una turbidez igual al patrón No. 1 de la escala de McFarland.
Para cada microorganismo tome dos tubos de 12 x 75 mm, marque un tubo como tubo prueba (P), y el otro como tubo control (TC).
Coloque en cada tubo 0,5 ml de la suspensión salina del microorganismo; al tubo prueba adicione 0,5 ml de desoxicolato de sodio al 10% y al tubo control adicione 0,5mL de la solución salina estéril (0,85%).
Mezcle suavemente los tubos e incube a 37°C por un período de 2 horas.
Examine la lisis del cultivo por aclaración del mismo después de 1 y 2 horas de incubación.
Soluble en bilis (reacción positiva): Hay un aclaración visible de la suspensión del tubo que contiene desoxicolato de sodio y sin cambios en la suspensión control con solución salina.
Insoluble en bilis (reacción negativa): No hay cambio en la turbidez de la suspensión del tubo que contiene desoxicolato de sodio, en comparación con la suspensión control en solución salina.

NOTA: Un resultado de solubilidad parcial es interpretado como positivo.