Consideraciones de bioseguridad
- Consideraciones generales para patógenos clase II.
- Utilizar cabina de bioseguridad para prácticas microbiológicas con potencial formación de aerosoles.
- Cuando se procesan hemocultivos, mantener las botellas dentro de la cabina de bioseguridad o utilizar mascara protectora.
- Utilizar siempre guantes
- Utilizar descartador de agujas. Nunca intentar colocar la tapa protectora sobre la aguja manualmente
- La presencia de mujeres embarazadas e individuos potencialmente inmunodeprimidos debe estar absolutamente prohibida en áreas donde se manipule Listeria monocytogenes.
El diagnóstico bacteriológico de la bacteriemia depende del estudio de los hemocultivos.
Debido a la sensibilidad de los métodos de cultivo, el procedimiento debe ser controlado cuidadosamente desde la etapa pre-analítica (recolección de la muestra) para evitar la interpretación errada de la recuperación de microorganismos que corresponden a comensales de piel.
El volumen total de sangre debe ser extraído por punción venosa a partir de dos sitios anatómicos distintos para permitir la evaluación en el laboratorio ante la aparición de un microorganismo comensal de piel aislado en un solo hemocultivo
Recolección y transporte de muestra
Materiales
- Alcohol etílico al 70% o yodo povidona
- Frascos para hemocultivo
- Guantes
- Jeringa y aguja para extracción venosa
Procedimiento para la obtención de muestra
Técnica aséptica. Instrucciones
- Lavarse las manos con agua y jabón y secarse con gasa estéril o toalla descartable
- Quitar la tapa protectora del frasco y desinfectar con iodo povidona
- Lavar la piel del paciente con agua y jabón; secar con gasa estéril o desinfectar con alcohol etílico al 70%
- Colocar el lazo, palpar la vena a punzar
- Desinfectar la piel con iodo povidona, con movimientos circulares del centro hacia afuera.
- Toma de muestra
- El operador antes de comenzar la tarea deberá colocarse camisolín, barbijo y guantes
- Punzar la vena seleccionada y extraer sangre, la cantidad dependerá del tipo de frasco a utilizar, en general se usa en dilución al 10%.
- SI PIERDE LA VENA, DEBE DESINFECTARSE NUEVAMENTE LA PIEL, UNA VEZ SELECCIONADA LA NUEVA VENA, USAR JERINGA Y AGUJAS NUEVAS
- Inclinar el frasco antes de colocar la sangre para evitar reflujo
- Inocular la sangre y homogeneizar por rotación para evitar la coagulación
- Descartar el material utilizado, desinfectar sector de trabajo con lavandina, quitarse guantes y barbijo y colocar todo en la bolsa de residuos
- Rotular la muestra y colocarla en la bolsa de transporte
- Remitir al laboratorio
CANTIDAD DE SANGRE A EXTRAER POR PUNCIÓN VENOSA
| Volumen de extracción | Sistema de hemocultivo | Sangre a inocular |
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Neonatos: 0,5 a 2 ml
1 mes a 2 años: 2 a 3 ml
>de dos años: 3 a 5 ml
Adolescentes: 10 a 20 ml
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Hemocultivo pediátrico convencional
Lisis - centrifugación
BacT / Alert
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0.5 a 3.0 ml de sangre por frasco
1.5 ml de sangre por cada tubo
0.5 a 3.0 ml de sangre por frasco
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| Adultos : 10 a 30 ml |
Hemocultivo pediátrico convencional
Lisis - centrifugación
BacT / Alert
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1ml de sangre por cada 10 ml de medio líquido
10 ml de sangre por cada tubo
10 ml de sangre por botella
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NÚMERO DE MUESTRAS E INTERVALOS DE TIEMPO ENTRE LAS TOMAS
| Diagnóstico presuntivo | Número de muestras e intervalos de tiempo entre tomas |
| Sepsis aguda, meningitis, osteomielitis, artritis, neumonía, pielonefritis |
Listeria monocytogenes Tomar 2 muestras de dos sitios diferentes antes de comenzar la terapia antimicrobiana En casos de presunción de bacteriemia intermitente (abscesos, artritis, osteomielitis) se podrían justificar obtener tres muestras en 24 horas |
Fuente: Servicio Bacteriología Especial Departamento de Bacteriología Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas A.N.L.I.S. “Dr. Carlos G. Malbrán” (2008). Manual de Procedimientos Aislamiento, identificación y caracterización de Listeria monocytogenes. Buenos Aires: Callejo, R. , Prieto, M. , Martínez, C. , Aguerre, L. , Rocca, F. y Martínez G.
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