Consideraciones de bioseguridad

  • Consideraciones generales para patógenos clase II.
  • Utilizar cabina de bioseguridad para prácticas microbiológicas con potencial formación de aerosoles.
  • Cuando se procesan hemocultivos, mantener las botellas dentro de la cabina de bioseguridad o utilizar mascara protectora.
  • Utilizar siempre guantes
  • Utilizar descartador de agujas. Nunca intentar colocar la tapa protectora sobre la aguja manualmente
  • La presencia de mujeres embarazadas e individuos potencialmente inmunodeprimidos debe estar absolutamente prohibida en áreas donde se manipule Listeria monocytogenes. 

El diagnóstico bacteriológico de la bacteriemia depende del estudio de los hemocultivos.

Debido a la sensibilidad de los métodos de cultivo, el procedimiento debe ser controlado cuidadosamente desde la etapa pre-analítica (recolección de la muestra) para evitar la interpretación errada de la recuperación de microorganismos que corresponden a comensales de piel.

El volumen total de sangre debe ser extraído por punción venosa a partir de dos sitios anatómicos distintos para permitir la evaluación en el laboratorio ante la aparición de un microorganismo comensal de piel aislado en un solo hemocultivo

Recolección y transporte de muestra

Materiales

  • Alcohol etílico al 70% o yodo povidona
  • Frascos para hemocultivo
  • Guantes
  • Jeringa y aguja para extracción venosa 

Procedimiento para la obtención de muestra

Técnica aséptica. Instrucciones

  • Lavarse las manos con agua y jabón y secarse con gasa estéril o toalla descartable
  • Quitar la tapa protectora del frasco y desinfectar con iodo povidona
  • Lavar la piel del paciente con agua y jabón; secar con gasa estéril o desinfectar con alcohol etílico al 70%
  • Colocar el lazo, palpar la vena a punzar
  • Desinfectar la piel con iodo povidona, con movimientos circulares del centro hacia afuera.
  • Toma de muestra
  • El operador antes de comenzar la tarea deberá colocarse camisolín, barbijo y guantes
  • Punzar la vena seleccionada y extraer sangre, la cantidad dependerá del tipo de frasco a utilizar, en general se usa en dilución al 10%.
  • SI PIERDE LA VENA, DEBE DESINFECTARSE NUEVAMENTE LA PIEL, UNA VEZ SELECCIONADA LA NUEVA VENA, USAR JERINGA Y AGUJAS NUEVAS
  • Inclinar el frasco antes de colocar la sangre para evitar reflujo
  • Inocular la sangre y homogeneizar por rotación para evitar la coagulación
  • Descartar el material utilizado, desinfectar sector de trabajo con lavandina, quitarse guantes y barbijo y colocar todo en la bolsa de residuos
  • Rotular la muestra y colocarla en la bolsa de transporte
  • Remitir al laboratorio

CANTIDAD DE SANGRE A EXTRAER POR PUNCIÓN VENOSA

Volumen de extracción Sistema de hemocultivo Sangre a inocular
Neonatos: 0,5 a 2 ml
1 mes a 2 años: 2 a 3 ml
>de dos años: 3 a 5 ml
Adolescentes: 10 a 20 ml
Hemocultivo pediátrico convencional
Lisis - centrifugación
BacT / Alert
0.5 a 3.0 ml de sangre por frasco
1.5 ml de sangre por cada tubo
0.5 a 3.0 ml de sangre por frasco
Adultos : 10 a 30 ml
Hemocultivo pediátrico convencional
Lisis - centrifugación
BacT / Alert
1ml de sangre por cada 10 ml de medio líquido
10 ml de sangre por cada tubo
10 ml de sangre por botella

 

NÚMERO DE MUESTRAS E INTERVALOS DE TIEMPO ENTRE LAS TOMAS

Diagnóstico presuntivo Número de muestras e intervalos de tiempo entre tomas
Sepsis aguda, meningitis,
osteomielitis, artritis,
neumonía, pielonefritis
Listeria monocytogenes
Tomar 2 muestras de dos sitios diferentes antes de comenzar la terapia antimicrobiana
En casos de presunción de bacteriemia intermitente (abscesos, artritis, osteomielitis) se podrían justificar obtener tres muestras en 24 horas

 

Fuente: Servicio Bacteriología Especial Departamento de Bacteriología Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas A.N.L.I.S. “Dr. Carlos G. Malbrán” (2008). Manual de Procedimientos Aislamiento, identificación y caracterización de Listeria monocytogenes. Buenos Aires: Callejo, R. , Prieto, M. , Martínez, C. , Aguerre, L. , Rocca, F. y Martínez G.

Pruebas

  • Producción de Pigmentos +

    PROCEDIMIENTO
    •Sembrar las cepas en Agar Nutritivo ó TSA (en estría).
    •Incubar a 37°C por 24 horas.
    •Dejar a temperatura
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