Prueba de Pyr (Determinación de la enzima Pirrolidonil Arilamidasa)
FUNDAMENTO
La prueba de PYR se utiliza como prueba rápida para la diferenciación presuntiva de los Enterococcus spp de los Streptococcus del grupo D (S. bovis).
El sustrato utilizado es la L-pirrolidonilo a naftilamida (PYR por sus siglas en inglés). Este compuesto es hidrolizado por la enzima pirrolidonilopeptidasa. La hidrólisis del sustrato por esta enzima libera a naftilamida libre, que se detecta al agregar el reactivo p-dimetil-dimetil-aminocinamaldehido. Si la hidrólisis se llevó a cabo, se forma un compuesto de color rojo cereza oscuro.
La prueba de PYR se utiliza como prueba rápida para la diferenciación presuntiva de los Enterococcus spp de los Streptococcus del grupo D (S. bovis).
El sustrato utilizado es la L-pirrolidonilo a naftilamida (PYR por sus siglas en inglés). Este compuesto es hidrolizado por la enzima pirrolidonilopeptidasa. La hidrólisis del sustrato por esta enzima libera a naftilamida libre, que se detecta al agregar el reactivo p-dimetil-dimetil-aminocinamaldehido. Si la hidrólisis se llevó a cabo, se forma un compuesto de color rojo cereza oscuro.
PROCEDIMIENTO
Con un palillo descartable tomar 2 ó 3 colonias del cultivo puro de 24 horas de incubación y realizar un frotis en la superficie del cuadrante de la lámina que ha elegido para el caso.
La lámina contiene cuatro cuadrantes para trabajar.
Agregar una gota del reactivo p-dimetil-dimetil-aminocinamaldehido
Realizar la lectura inmediatamente. Si no hay desarrollo de color realizar la segunda lectura al minuto de haber agregado el reactivo.
Fuente: Manual de Procedimientos de Bacteriología Médica del CNDR/MINSA edición 2004