La Reacción de Quellung prueba positiva.

La Reacción de Quellung prueba negativa.

Fuente: Habib M., Porter B. (2014). Jove. Recuperado 22 de Octubre del 2017. 

La Reacción de Quellung es la técnica estándar de oro para la serotipificación Streptococcus pneumoniae. Esta técnica utiliza un microscopio y antisueros neumocócica específica y se utiliza comúnmente en referencia y laboratorios de investigación en todo el mundo.

Hay más de 90 diferentes serotipos capsulares de Streptococcus pneumoniae (neumococo)

La serotipificación capsular puede proporcionar información útil para los estudios de eficacia y de impacto de la vacuna.

FUNDAMENTO

El método implica la evaluación de una suspensión celular neumocócica con antisueros agrupada y específica dirigida contra el polisacárido capsular. Las reacciones antígeno-anticuerpo se observan microscópicamente.

Una reacción positiva de Quellung se produce cuando anticuerpos de tipo específico se une a la cápsula del neumococo, que conduce a un cambio en su índice de refracción. Cuando se observa bajo un microscopio, las bacterias parecen 'hinchada' y más visible

PROCEDIMIENTO

El protocolo tiene tres pasos principales:

1) Preparación de una suspensión de células bacterianas.

2) De mezcla de células y antisuero sobre un portaobjetos de vidrio.

3) La lectura de la reacción de Quellung usando un microscopio con aumento 400x. La reacción de Quellung es razonablemente fácil de realizar y se puede aplicar siempre que sea un microscopio y antisueros adecuados están disponibles.

La reacción de Quellung es simple y rápida y se puede realizar en cualquier laboratorio que está equipado con un microscopio de buena calidad y conjunto apropiado de antisueros.

INTERPRETACIÓN

Usando un microscopio, observar la suspensión bajo contraste de fase con una ampliación de 400X. Se observa una reacción negativa Quellung cuando poco o nada de 'hinchazón' de las células neumocócicas pueden verse en Magnificación 400X, similar a lo que se observa en la suspensión celular neumocócica sin antisueros añadió (control negativo). Se observa una reacción positiva de Quellung cuando las células aparecen ampliada o "hinchado" y más visible cuando se compara con las células en el control negativo. 

Nota: reacciones dudosos deberán investigarse más a fondo, por ejemplo mediante el examen de la reacción después de 5-10 minutos de incubación a temperatura ambiente, o mediante la repetición de la reacción con antisuero más.

Demasiados células bacterianas añadidas al caldo puede dar lugar a la agregación de las células o una reacción falsa negativa. Se debe tener en cuenta en las muestras los inóculos de células neumocócicas en caldo que son "demasiado pesado o concentradas" o "demasiado ligero". 

Fuente:

Habib M., Porter B. (2014). Jove. Recuperado 22 de Octubre del 2017.