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Hidrólisis del hipurato.
Fuente: Ayuda Pruebas de Identificación. Recuperado 21 de Octubre de 2017. http://edicion-micro.usal.es.
Hidrólisis del Hipurato Sódico, para diferenciación se utiliza para detectar la hidrólisis de hipurato sódico por los estreptococos beta-hemolíticos grupo B y otros organismos.
FUNDAMENTO:
El hipurato sódico, cuando es hidrolizado por la enzima bacteriana hipuricasa, da lugar a ácido benzoico y glicina. La prueba rápida de hipurato utiliza ninhidrina para detectar la presencia de glicina. La ninhidrina y la glicina producen una reacción por la cual se elimina el grupo amino y se origina agua y amoniaco. El amoniaco atraviesa una secuencia de pasos para producir un color morado.
PROCEDIMIENTO:
1. Inocular un asa grande de suspensión de cultivo de estreptococos B-hemolíticos en una alícuota de 0.4 mL del reactivo de hipurato de sodio al 1% en un pequeño tubo de prueba y emulsiones completamente.
2. Incubar el tubo en baño maría a 35 - 37°C durante 2 horas.
3. Agregar 0.2 mL(5gotas) del reactivo de ninhidrina y mezclar bien.
4. Vuelva a incubar el tubo durante 10 – 15 min y lea la reacción.
NOTA: No incube más de 30 min porque podría producirse una lectura falsa positiva.
5. Observe y anote los resultados
INTERPRETACIÓN:
Una reacción de hipurato positiva se indica por el cambio del color de la solución a azul morado. Una reacción de hipurato negativa se indica por la ausencia de un cambio del color de la solución.
S. agalactiae Hipurato Positivo (coloración azul morado).
S. pyogenes Hipurato Negativo (sin coloración).
Fuente:
Cromakit S.L. (2017). Granada. Recuperado 21 de Octubre del 2017. http://www.cromakit.es
streptococcus, pruebas bacteriológicas, cocos g+, hidrolisis del hipurato sodico