Una cepa presuntiva de C. diphtheriae debe someterse a pruebas de toxigenicidad y se realizan sólo en laboratorios de salud pública de referencia. 

Método de Elek modificado (Unidad de Referencia de Difteria de la OMS)

Un disco de papel filtro que contiene antitoxina (10 UI/disco) se coloca en una placa de agar. Los cultivos que se van a examinar en cuanto a toxigenicidad son inoculados al momento a 7 a 9 mm de distancia del disco. Después de 48 h de incubación, la antitoxina que se difunde desde el disco de papel ha precipitado la toxina que se difunde desde los cultivos toxígenos y ha producido bandas de precipitina entre el disco y el crecimiento bacteriano. 

Método de la Polimerasa

Métodos a base de la reacción en cadena de la polimerasa para la detección del gen de la toxina diftérica (tox). Los análisis de PCR para tox también se pueden utilizar directamente en los especímenes de los pacientes antes que se disponga de los resultados de cultivo. Un cultivo positivo confirma un análisis de PCR positivo. Un cultivo negativo después de la antibioticoterapia junto con un análisis de PCR positivo indica que el paciente probablemente tiene difteria.

Método Enzimoinmunoanálisis de Adsorción

Se pueden emplear enzimoinmunoanálisis de adsorción para detectar toxina diftérica de cepas de C. diphtheriae clínicas. No se llevan a cabo en todos los lugares.

Método Inmunocromografía

Un análisis de tira inmunocromográfica permite detectar toxinas de la difteria en cuestión de horas. Este análisis es muy sensible. No se llevan a cabo en todos los lugares.

Método Tradicional

De manera histórica, se ha demostrado la toxigenicidad de una cepa de C. diphtheriae mediante la inyección en dos cobayos de la cepa emulsificada. Si el cobayo protegido con antitoxina de la difteria sobrevive pero el no protegido fallece, se considera que la cepa es toxígena. Esta prueba se ha remplazado en gran parte por tecnología más moderna.

Fuente:

Mietzner, T. , Brooks,G. , Morse, S. , Carrol, K. y Butel,J. (2011). Microbiología Médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. México: McGraw-Hill.