Prueba de indol. Fuente: Manual de Procedimientos Bacteriológicos en Infecciones Intrahospitalarias. MINSA-INS. 2005

 

FUNDAMENTO

Es útil para determinar la capacidad de un microorganismo de producir indol a partir del aminoácido triptófano.

MEDIOS Y REACTIVOS
Caldo de triptófano o de peptona o caldo de triptona.

– Preparar de acuerdo con las indicaciones del fabricante.
– Distribuir en tubos, aproximadamente 4 mL por tubo.
– Autoclavar a 121 °C, 15 libras / pulg2, 15 minutos.
– Conservar refrigerado.
• Reactivo de indol de Kovacs
– Alcohol amilico o isoamílico (puede sustituirse por alcohol butílico) 150 mL

– p-dimetilamino-benzaldehido 10 g
– HCl concentrado 50 mL

 

Recomendaciones: El reactivo de Kovacs debe mantenerse refrigerado a 4 – 10 °C en un frasco ámbar con tapa de vidrio. Si se deja a temperatura ambiente durante un tiempo, cambiará de color y se hará menos sensible.

PROCEDIMIENTO
Retirar asépticamente 2 mL de caldo de cutivo con 24 horas de incubación.
Agregar 5 gotas de reactivo de Kovacs.
Mover suavemente el tubo y realizar la lectura.

Evaluar el cultivo a las 24 horas, si la lectura es negativa, deberá incubarse otras 24 horas el cultivo restante y repetirse la prueba.

 

RESULTADOS
Prueba positiva: Formación de un anillo rojo en la superficie del medio (la capa alcohólica).
Prueba negativa: No se produce color en la capa alcohólica, y toma el color del reactivo empleado.

 

Fuente: Manual de Procedimientos Bacteriológicos en Infecciones Intrahospitalarias. MINSA-INS. 2005